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临床医生和科学家使用各种工具来研究罕见病。 收集患者的数据和标本对于了解 TM 和 NMO 至关重要,但为了了解疾病的基本生物学特性,科学家通常使用疾病的动物模型。 迄今为止,还没有公认的特发性横贯性脊髓炎 (TM) 或视神经脊髓炎 (NMO) 动物模型。 然而,几十年来,一直存在一种称为实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 的多发性硬化症实验模型。 该模型不完善,不能完全复制 MS,但可用于各种实验。 在人类中,MS、TM 和 NMO 被认为是由意外针对大脑、视神经或脊髓的免疫系统引起的。 在 EAE 中,小鼠的免疫系统准备好瞄准大脑、视神经或脊髓。 在人类中,免疫系统的不同部分(例如 B 细胞和 T 细胞)在 MS、TM 和 NMO 的发病机制中起着关键但可变的作用。EAE模型的神经症状通常根据Kono等提出的标准分为5级。上海专门做eae模型哪家口碑好
EAE模型的发展与年龄密切相关。幼龄动物发病后症状很快达到高峰,随后又迅速恢复,和成年动物相比病程较短,其抗原注射部位及CNS内的炎性细胞浸润程度较轻,并且幼龄动物体重偏小,一般情况差,易出现麻醉意外而死亡。若动物体重(周龄)偏大,则发病延迟,且症状较重,所以选择受试动物以青年期为佳。但若作为抗原提供者,其年龄可适当放宽,一般大于4周即可。MS多为青年女性,EAE的发生也存在性别差异。一般来讲,雌性动物较雄性敏感,表现在雌性动物的发病率高,临床症状相对严重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的动物如Lewis大鼠,雄性较雌性敏感。另外实验时间选择在夏季比冬春季节诱导动物模型的敏感性更高。敏感性高的动物,有时症状较严重且死亡率高,应引起注意。上海专门做eae模型哪家口碑好EAE模型的诱导有主动诱导法和被动诱导法两种。
获取实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠小胶质细胞,并检测其特性。方法取8周龄,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至发病高峰期(第15天)时以PBS灌注后取小鼠后脑和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通过100μm滤网滤过,而后采用Percoll密度梯度离心法分离获取单个核细胞,进一步利用CD11b与CD45抗体染色,通过流式细胞仪分选CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)细胞,即分别得到相对活化和静息的小胶质细胞,***对流式分选获取的小胶质细胞行qPCR检测。结果通过形态比较,获得了高纯度的小胶质细胞。FIZZ-1基因行qPCR检测,结果显示在EAE急性期M2型小胶质细胞明显增多,符合文献报道。结论该方法能从EAE小鼠体内分离获取高纯度的小胶质细胞,可用于相关目的基因后续检测。
在EAE动物模型中,科学家们得以观察到神经系统受损后的再生和修复过程,这为神经修复研究提供了极为宝贵的重要线索。这一模型不仅模拟了多发性硬化症(MS)等神经系统疾病的病理过程,还使得我们能够直观地观察到受损神经系统的自我修复能力。通过观察EAE动物模型中神经元的再生、轴突的重新生长以及突触连接的重塑等现象,科学家们可以深入了解神经修复的内在机制。同时,这一模型也为研究神经修复提供了新的思路和方法,例如通过调控特定的信号通路或利用外源性因子来促进神经再生和修复。因此,EAE动物模型在神经修复研究领域中发挥着不可或缺的作用,有望为神经系统疾病的治疗带来**性的突破。啮齿动物EAE模型仍有许多局限性。
从鸟类到哺乳类的多种动物如鸡、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、羊、犬、猴等均可成功诱发EAE,但不同种属或同一种属不同品系动物的敏感性有很大差异。对EAE敏感的动物有Lewis、DA大鼠,PL/J、SJL/J小鼠,Hartley、Strain13豚鼠。虽然豚鼠对诱发EAE相当敏感,但其品系复杂,有关试剂缺乏,一般不常用作实验对象。相比之下大鼠及小鼠的背景知识及相关试剂则较为普遍,遗传学、免疫学等方面的研究也较深入,且其EAE在临床、病理、免疫及生化改变等方面都与人类脱髓鞘疾病较为相似,因此应用比较为普遍。EAE能再现MS的很多临床和病理特征。上海专门做eae模型哪家口碑好
T细胞更易通过血脑屏障作用于神经髓鞘)建立EAE模型。上海专门做eae模型哪家口碑好
用大鼠制备EAE有许多优点,如品系多,选择余地大,繁殖快,同一品系中个体间差异小,实验方便。其中Lewis大鼠诱发的EAE具有稳定性好、敏感性高等特点,其病程为单相,多数可自行恢复,对再次诱发很快产生强的耐受性,多用作EAE激发和缓解机制的研究。而SJL/L及PL/J小鼠对再次诱发的敏感性没有明显降低,且几乎可见到人类MS的所有病理改变,可诱发出更接近于人类MS的缓解复发型EAE模型,但它的EAE发生率及潜伏期变化较大。人们对小鼠的遗传背景了解得比较清楚,因此小鼠更适用于有关基因、细胞间作用等领域的研究。然而不同品系小鼠对EAE的敏感性也不同,有人将其分为EAE—易感(EAE—susceptible)和EAE—抵抗(EAE?resistant)两种类型。基因型分析结果表明,单倍型为H?2s的小鼠(如SJL/J)及H?2q的小鼠(如DBA1/J)属于EAE—易感型。C57BL/10J及P/J小鼠可发生轻微的脱髓鞘病变。BABL/C和AKR/J小鼠基本不发生EAE,被认为是EAE—抵抗小鼠。上海专门做eae模型哪家口碑好